Wpływ HIV Przeciwciało VRC01 na odbicie wirusa po przerwaniu leczenia ad 9

Podobne wzory zaobserwowano w miejscu wiążącym VRC01 u uczestników badania A5340 (ryc. S10 w dodatkowym dodatku). Wybór dla odpornych na VRC01 wirusów odskakujących
Rola oporności na VRC01 przy wirusowym odbiciu w obecności wysokich stężeń VRC01 w badaniu A5340 została oceniona przez klonowanie wybranych genów env z 46 quasi-gatunków i linii zebranych w okresach przed-ART i okresach ponownego odbicia badania (mediana, 3). geny env pre-ART i 3 odbicia na uczestnika). Te geny env zostały sklonowane, wyrażone jako pseudowirusy i przetestowane pod kątem wrażliwości na neutralizację za pomocą VRC01. Czytaj dalej Wpływ HIV Przeciwciało VRC01 na odbicie wirusa po przerwaniu leczenia ad 9

Wpływ HIV Przeciwciało VRC01 na odbicie wirusa po przerwaniu leczenia ad 8

Sekwencje od uczestnika A03 zostały przetestowane pod kątem klastrów; Testy najbliższego sąsiada Slatkina-Maddisona i Hudsona wspierają kompartmentalizację sekwencji (odpowiednio P <0,001 i P = 0,004). Jak pokazano w panelu D, uczestnik A07 miał poliklonalne odbicie wirusa wrażliwego na VRC01. Jak pokazano w Panelu E i F, porównano pseudotypowany wirus z ośmiu uczestników z dostępnymi próbkami przed ART i odbiciem pod kątem zmian w czułości neutralizacji za pomocą IC50 (obcięty przy 25 .g na mililitr) (Panel E) i 80% stężenia hamującego ( IC80) (skrócone w 50 .g na mililitr) (Panel F) z zastosowaniem wielopoziomowych modeli efektów losowych (losowy przecinek i nachylenie) w celu uwzględnienia wielu klonów na uczestnika w każdym punkcie czasowym. Obliczono dwustronną wartość P dla szacowanej różnicy w przed ART i odporności na odbicie. Średnie miana są pokazane dla wirusa przed-ART po lewej stronie i wirusa odbicia po prawej. Czytaj dalej Wpływ HIV Przeciwciało VRC01 na odbicie wirusa po przerwaniu leczenia ad 8

Wpływ HIV Przeciwciało VRC01 na odbicie wirusa po przerwaniu leczenia ad 7

Jednak jego wiremia osoczowa odbił się wkrótce po drugiej przerwie ART. Charakterystyka farmakokinetyczna VRC01
Poziomy VRC01 w osoczu, które uzyskano w wyniku biernej infuzji, były podobne do poziomów odnotowanych w poprzednich badaniach.23,24 W badaniu A5340 uczestnicy otrzymywali 40 mg VRC01 na kilogram co 3 tygodnie dla trzech dawek i utrzymywali zmierzone poziomy VRC01 w osoczu znacznie powyżej 50 .g na mililitr na 8 tygodni (mediana, 175 .g na mililitr, zakres, 68 do 1494) (ryc. S6 w dodatku uzupełniającym).
W badaniu NIH uczestnicy otrzymywali 40 mg VRC01 za kilogram co 2 tygodnie w przypadku pierwszych trzech dawek, a następnie co miesiąc przez okres do 6 miesięcy. Uczestnicy badania NIH utrzymywali poziomy VRC01 w osoczu powyżej 100 .g na mililitr w prawie wszystkich punktach czasowych podczas próby (ryc. Czytaj dalej Wpływ HIV Przeciwciało VRC01 na odbicie wirusa po przerwaniu leczenia ad 7

Komórki siatkówki indukowane autologicznie wywołane komórkami macierzystymi w zwyrodnieniu plamki żółtej ad 7

Podobne powiększenie obszaru pigmentowego zaobserwowano w poprzednim badaniu, w którym stosowano komórki RPE pochodzące z ludzkich embrionalnych komórek macierzystych.21 Optyczne koherencyjne obrazy tomograficzne wykazywały dobrą integralność siatkówki ponad przeszczepem w ciągu roku po przeszczepie, z obszarem o wysokiej gęstości. , co może wskazywać na obszar odzyskiwania wewnętrznych i zewnętrznych segmentów komórek fotoreceptorów. Obserwowano podobne obserwacje w zakresie tworzenia segmentów wewnętrznych i zewnętrznych po transplantacji siatkówki u zwierząt.29,30 Jednakże, musimy jeszcze ocenić stopień funkcji fotoreceptorowej przeszczepu RPE u Pacjenta 1. Głównym problemem związanym z komórkowymi terapiami transplantacyjnymi jest rakotwórczość. Wysoce proliferacyjne komórki przeszczepione, takie jak komórki progenitorowe, wymagają oceny integralności genomu; dla komórek o niskiej szybkości proliferacji, takich jak komórki RPE pochodzące z iPSC, testy rakotwórczości in vivo uważa się za odpowiednie. Czytaj dalej Komórki siatkówki indukowane autologicznie wywołane komórkami macierzystymi w zwyrodnieniu plamki żółtej ad 7

Komórki siatkówki indukowane autologicznie wywołane komórkami macierzystymi w zwyrodnieniu plamki żółtej ad 6

Pooperacyjna najlepiej skorygowana ostrość wzroku nie uległa poprawie, ale utrzymywała się na poziomie około 0,1 (co odpowiada 20/200 na wykresie Snellena) po roku i przez cały okres obserwacji. (Patrz Fig. S9B i S9C w dodatkowym dodatku.) Pacjent nie otrzymał zastrzyków przeciw VEGF po operacji. Jej wynik w Kwestionariuszu Funkcjonowania Wizualnego National Eye Institute (VFQ) -25 (na którym wyniki wahają się od 0 do 100, z wyższymi wynikami wskazującymi na lepszą funkcję wzroku i ogólny stan zdrowia) wzrósł z 48,8 (przed operacją) do 58,3 (1 rok po operacji ). Czułość siatkówki, oceniana za pomocą mikroperymetrii, pozostawała na poziomie 0 dB w obrębie dołka i jongta-fovea przed i po operacji, ale punkty mocowania przesunęły się bliżej dołka w obszarze przeszczepu, co wskazuje, że przeszczep był funkcjonalny, chociaż utrwalenie było nietrwały. Czytaj dalej Komórki siatkówki indukowane autologicznie wywołane komórkami macierzystymi w zwyrodnieniu plamki żółtej ad 6

Komórki siatkówki indukowane autologicznie wywołane komórkami macierzystymi w zwyrodnieniu plamki żółtej ad 5

Linii komórkowej RPE nie można było zidentyfikować na powierzchni włóknistej błony neowaskularnej w uszkodzeniu dołka, gdzie tworzyły się zewnętrzne kanaliki siatkówki.26 Po zabiegu duża obserwowana przed zabiegiem hiperrefleksyjna masa zniknęła całkowicie. Wysoce odblaskowa linia wskazująca na obecność komórek RPE w optycznym koherencyjnym obrazie tomograficznym – co odpowiadało obecności przebarwionego arkusza przeszczepionego na kolorowych zdjęciach dna oka – stopniowo z czasem ulegała wydłużeniu. Po 3 miesiącach i powyżej zaobserwowano, że silnie odbijająca RPE linia komórkowa przebiega dalej od arkusza przeszczepu do strony nosowej, a zewnętrzna membrana ograniczająca i przestrzeń naczyniówkowa były odpowiednio zatrzymane nad i pod linią, co wskazuje na obecność funkcjonalnych komórek RPE. Na arkuszu przeszczepu zewnętrzną warstwę jądra o współczynniku odbicia o wysokiej gęstości w przestrzeni odpowiadającej segmentom wewnętrznym i zewnętrznym zachowano po roku. (Rysunek 2B i Rys. Czytaj dalej Komórki siatkówki indukowane autologicznie wywołane komórkami macierzystymi w zwyrodnieniu plamki żółtej ad 5

Komórki siatkówki indukowane autologicznie wywołane komórkami macierzystymi w zwyrodnieniu plamki żółtej czesc 4

Odmiany pojedynczych nukleotydów, które zostały wykryte za pomocą sekwencjonowania całego genomu, w tym te wykryte w oryginalnych fibroblastach przy niskich częstotliwościach, nie zostały zgłoszone jako mutacje powodowane przez raka. W regionach kodujących białka nie wykryto dużych insercji lub delecji de novo ani zmian liczby kopii DNA. Ponadto potwierdziliśmy, że plazmidowy DNA nie został włączony do genomowego DNA. (Patrz rys. S7A i tabele od S7 do S12 w dodatkowym dodatku). Czytaj dalej Komórki siatkówki indukowane autologicznie wywołane komórkami macierzystymi w zwyrodnieniu plamki żółtej czesc 4

Komórki siatkówki indukowane autologicznie wywołane komórkami macierzystymi w zwyrodnieniu plamki żółtej cd

Pisemną świadomą zgodę uzyskano od pacjentów, a badanie przeprowadzono zgodnie z założeniami Deklaracji Helsińskiej. Wszystkie eksperymenty, które obejmowały wykorzystanie próbek uzyskanych od ludzi i wszystkie badania na zwierzętach, zostały zweryfikowane i zatwierdzone przez komisję ds. Przeglądu instytucjonalnego w Fundacji Biomedycznych Badań i Innowacji oraz Centrum Badań Rozwoju RIKEN. Autorzy zapewniają rękojmię za kompletność i dokładność danych i analiz oraz za wierność badania do protokołu. Mierniki rezultatu
Podstawowymi wynikami tego przypadku były profil bezpieczeństwa i zdarzeń niepożądanych komórek RPE pochodzących z iPSC jako źródła przeszczepu i ocena procedury transplantacyjnej arkusza iPSC-RPE u osób z neowaskularną AMD. Czytaj dalej Komórki siatkówki indukowane autologicznie wywołane komórkami macierzystymi w zwyrodnieniu plamki żółtej cd

Komórki siatkówki indukowane autologicznie wywołane komórkami macierzystymi w zwyrodnieniu plamki żółtej ad

Poniżej przedstawiamy wyniki indukowanego przeszczepu z pluripotencjalną komórką macierzystą (iPSC) u pacjenta z wysiękową postacią AMD. Opisy przypadków
Pacjent
Rysunek 1. Rysunek 1. Generacja i przeszczepienie arkusza iPSC-RPE. Piętro A (trzy górne obrazy) pokazuje, że charakterystyka morfologiczna komórek arkusza iPSC-RPE (tj. Czytaj dalej Komórki siatkówki indukowane autologicznie wywołane komórkami macierzystymi w zwyrodnieniu plamki żółtej ad

Komórki siatkówki indukowane autologicznie wywołane komórkami macierzystymi w zwyrodnieniu plamki żółtej

Oceniliśmy możliwość transplantacji komórek nabłonka barwnikowego siatkówki (RPE) różniących się od indukowanych pluripotencjalnych komórek macierzystych (iPSC) u pacjentów ze zwyrodnieniem plamki związanym z wiekiem. IPSC zostały wygenerowane z fibroblastów skóry uzyskanych od dwóch pacjentów z zaawansowanym zwyrodnieniem plamki żółtej związanego z wiekiem i podzielono je na komórki RPE. Komórki RPE i iPSC, z których zostały wyprowadzone, poddano obszernym testom. Operację obejmującą usunięcie błony naczyniowej i transplantację autologicznego arkusza z komórek RPE iPSC pod siatkówką wykonano u jednego z pacjentów. W rok po zabiegu przeszczepione prześcieradło pozostało nietknięte, najlepiej skorygowana ostrość wzroku nie uległa poprawie ani pogorszeniu, a obecny był torbielowaty obrzęk plamki. Czytaj dalej Komórki siatkówki indukowane autologicznie wywołane komórkami macierzystymi w zwyrodnieniu plamki żółtej